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コスモ会質問箱(Q&A)
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コスモ会質問箱(Q&A)
私の職場では培地の加温溶解にオートクレーブを使用しています。
デソキシコレート培地の注意などを見ると加温をし過ぎると培養に支障をきたすと記載されていますが、オートクレーブで100℃30分の加温は適切でしょうか?
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乳酸菌の判定について
1)乳酸菌培養に「BCP加プレートカウントアガール」を使用しています。
判定は72時間後に黄変したコロニーをカウントするとのことですが、この培地は標準寒天培地が基礎となっているとの事で、乳酸菌以外の菌も発育してきます。培地マニュアルでは、「判定の原理」で乳酸菌がブドウ糖を発酵して培地を酸性にする為pH指示薬が黄変し、コロニーおよび周囲の培地が黄色となるとあります。
しかしながら、培地内に耐熱性菌等が混在する場合、乳酸菌が存在しても培地が紫色に戻る事があるようで、この場合の判定をどうしたものかと苦慮しております。72時間までに黄変していたものが72時間後に紫色に戻っていた場合どう判定したらいいのでしょうか?
2)また、例えば休日前に培養したものを72時間後に判定する場合、1)で書いたように途中が黄変していたかどうか確認する事が出来ない時に、もし黄変していないコロニーが存在した場合にそれを乳酸菌かどうかを確認するにはBCPでプレートを作って釣菌して画線塗抹といった方法でいいのでしょうか?
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醗酵か腐敗かのように人に有用か有害かのくくりはどこで判断されるのでしょうか。
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無加熱摂取で乾燥食品などの場合、真菌(カビ)における基準はありますでしょうか。
一般に乾物などは、加熱を行なって食するものなので、ある程度カビが確認されても大丈夫であるとは思いますが、例えば、真菌検査においてカビが確認された場合、菌数の良否基準はありますでしょうか?
真菌の場合、目で見て食材の腐敗状況がわかってしまうかどうかが、判断の際に重要であるとお聞きしたことがあるのですが、目で見てカビを確認することができなくても真菌検査においての真菌の基準のラインをどこで設ければよいのでしょうか。(食べても体に害がないと言えるかどうかのライン)
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低温細菌について、教えていただきたいのですが、低温細菌の明確な定義はありますでしょうか。 又、低温細菌の検査法としては、食品衛生検査指針では〔標準寒天培地、7±1℃で7日間培養〕となってますが、その他の検査法はありますでしょうか。
又、弊社では10℃のインキュベーターしか空いていないのですが、10℃の場合は何日培養にすればよろしいでしょうか。
菌検査初心者なので、分かりやすく教えていただけると大変助かります。
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乳酸菌の測定にBCP加寒天培地を使わせていただきました。
混釈、重層し微好気性条件下、35℃で培養したところ、24時間後に黄変したコロニーが観察されました。取説の72時間という培養時間よりかなり早く生育しているように思われます。
これは乳酸菌なのでしょうか。乳酸菌以外の菌も同じような黄変した集落を形成するのでしょうか。また、それはどういった菌なのでしょうか。
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初歩的な質問で申し訳ありませんが、ご回答をお願い致します。
複数種類の平板培地に同一検体を塗抹する場合、同じコンラージ棒で続けて塗抹すると、何か支障がありますか?
現在は、各培地に塗抹するたびアルコールに浸け、火炎消毒しています。これを省略できると、時間短縮できるのですが・・・・。
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御社のX-GAL培地、デソキシコーレイト培地を使用しています。 上記の培地は、22時間以上培養すると大腸菌群以外の菌が検出されてしまいますか? 仮に、培養時間を延長した場合の注意点等がありましたら、教えていただきたいです。
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胃粘膜のホモジネートサンプルを用いて培養した場合に、着色したコロニーが発育するとのことですが、もし、ヘリコバクター属細菌以外の細菌(口腔内常在菌、乳酸菌など)が発育した場合には、着色しないと考えてよろしいのでしょうか?すなわち、着色原理がヘリコバクター属細菌に対して、特異的なのかどうかを教えてください。
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容器に湿っぽさが残っているものと、乾いているものを比較して雑菌の有意差を確認したい。テスト、及びテスト品の処理までお願いしたいので、ご教示をお願いします。
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現在、下水中や河川中の大腸菌群・大腸菌濃度をXM-G培地を用いて測定を行っているのですが、 当方としては大腸菌は大腸菌群のカテゴリーに含まれるものであると認識しております。 そこで、大腸菌群数を計数する際、赤色のコロニーの数と青色のコロニーの数を足し合わすべきなのか判断に困っております。 それとも、大腸菌群数=赤色のコロニー数なのでしょうか?
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フィルター付きストマフィルターにサンプル10g、滅菌済み0.1%ペプトン加生理食塩水90mlを入れストマッカーにかけるときについて教えて下さい。
弊社では、無菌操作を重視するために上記の作業を含め培地を流し込むまでエアコンをOFFにしてガスバーナーを着火し、空気の流れをコントロールした条件下で検査しています。 査察に行った、会社では、上記の操作はエアコンON、ガスバーナー設置していない(卓上タイプもなし)。検査室は4畳ぐらいのスペースで人の複数で作業しています。シャーレに接種し、培地に流し込む工程は簡易的なクリーンベンチで行う。
そこで、質問ですが、最終的には、求める菌検査のレベル(製品の規格値など)で変わると思うのですが、ストマッカーにかける処理について、エアコンONでガスバーナーの無い環境下でのサンプリングは検査として一般的なの事でしょうか?
もし、良ければ、御社ではどのように行っているか教えていただけると助かります。
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私は弊社にてただ今ビオチンの微生物定量を試みております。
しかしながら今年に入ってからきちんとしたデータが取れない状態です。
現在、粉末状の粉ミルクに標準物質の希釈液を加え、濃度を振って測定しようとしているのですが、吸光度1を超えるような値が全体的にバラバラと出て測定ができません。
測定培地は何度かロットが替わっておりますし、標準液も作り直し、濃度調整の仕方も間違っていないと思います。
希釈は段階希釈を行っておりその差が見られると思われるときもあるのですが、ビオチンが濃い濃度の時は返って吸光度が低くなる時もありよくわかりません。
菌液は凍結保存しているのですが確認のために違う日にちに作成したものを使っても有意な差は現れませんでした。
また、寒天培地に菌液をひいても乳酸菌と思われる一種のコロニーしか確認できません。 全体を通してビオチンに依存せずランダムに高い吸光度が出ているので、疑われるとしたらコンタミかと思いますが、見落としがちなコンタミの原因といえばどのようなものが考えられるでしょうか?
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食品工場での落下菌測定についての質問です。現在は、標準寒天培地を流したシャーレを測定場所に開放放置して測定していますが、コンパクトドライを使用することも可能でしょうか。簡単に置けて測定できるものを検討していますので、コンパクトドライが向いていなければ、他を紹介していただけたらと思います。また、ラインの拭き取り検査はフードスタンプでよろしいでしょうか。
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標準寒天培地で一般生菌数をカウントする場合ですが、当社では基本は24時間後の菌数をカウントして、それを一般生菌数としています。
しかしながら、当工場で生産している一部の製品において、24時間~48時間くらいまでであれば、全くでなかったコロニーが、培養時間が長くなると出ることがあります。
製品は、焼成後に冷凍された、加熱済みのレンジタイプのお好み焼です。通常は、一般生菌数は0です。
同じようなたこ焼も製造しているのですが、たこ焼ではそのような現象は見られません。 このお好み焼に限り、培養時間の延長に伴い、コロニーが出ます。大体2乗くらいです。 同時に培養する、その他の未加熱品でも、培養時間延長によるコロニーの増加は見られません。この現象について、おしえていただければと思っております。
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○貴社の標準寒天とTGSE寒天で体の各部の細菌検査を行い、そのコロニーの一部を採取しグラム染色をいたしました。同定検査をし菌を確定すべきところですが、その知識も技術も持ち合わせておりません。コロニーの写真とグラム染色の写真を添付いたしますので、この段階で分かり得る菌の情報を教えていただきたくお願いいたします。
またTGSE寒天で繁殖しました黒色コロニーは周辺部が白濁していることから、黄色ブドウ球菌と判断してよろしいでしょうか。この二点について、お答えいただきたくよろしくお願い申し上げます。
○貴社の簡易培地を学生実習に利用させていただいております。私は細菌学の専門家でもなくわからないことが多いのですが、質問箱を拝見して、時々勉強させていただいております。先ほどの問合せコーナーより初歩的な質問を送らせていただきました。添付しました写真からだけではあまり情報も得られないとは思いますが、わかる範囲でお教えいただきたくよろしくお願いいたします。
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クロストリジア培地を使用させていただいておりますが、お茶の菌数を測定しようと接種したところ、培地が一瞬で真っ黒になりました。 なぜそうなるのか知りたいことと(反応など)、回避方法等があるのかご教授いただけたらと思いご連絡致しました。
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早速ですがBGLB培地の作成についてお教えください。
弊社は飲料製品の検査にBGLBを使っております。ダーラム管を入れた試験管にBGLB9mlを分注して121℃15分オートクレーブ後急冷にて使用していますが、ダーラム管の上部にわずかに気泡が残ってしまうのです。キャップを替えて作成してみたのですが同じでした。気泡を残さない様な作成方法を、教えてください。
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変法TGC培地への摂取方法について質問です。
変法TGC培地を入れた試験管へ検体を摂取する際、今までは液面より上から摂取をして、培地と検体を混ぜていましたが、底部から引き上げるように摂取する方法があることを最近知りました。
好気生と嫌気性、どちらの菌も見る目的で使用していますが、今までの摂取方法でも良いのでしょうか?教えてください。
特にきちんとした書類での引継ぎをされてきたものではないため、自分達が誤っている可能性があると思っています。また、この培地は寒天を加えたり、流動パラフィンを重ねる場合などありますが、全て同じ方法で摂取していました。
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先日 営業の方から イムノクロマトVTを紹介されました。
現在O-157の検査は、イムノクロマトO157を使用し陽性の場合は、クロモアガー CLIG にて確認試験をしております。
しかし、結果がでるのが72時間後と遅い為、その代わりにイムロクロマトO157が陽性の場合、イムノクロマトVTで確認すれば良いのでは、という事でした。
ここで疑問点が3つ まず1つめは、イムロクロマトO157で陽性の場合O-157でないという事はあるのでしょうか?あるとしたらどの様な場合なのでしょうか?
2つめは、イムノクロマトO157陽性の場合 イムノクロマトVTが陰性になる事は、あるのでしょうか?それは、どの様な場合でしょうか?
3つめは、イムノクロマトO157陽性でイムノクロマトVT陰性の場合O-157陰性と判定して良いのでしょうか?
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上記のキットで使用するポリミキシン溶液についてですが、ポリミキシンを溶解するときに使用する水溶液は何を使用すればいいのでしょうか?
今まで滅菌精製水を使用していましたが、偽陽性反応がでてしまいます。精製水を使用した理由は、デュオパスベロドキシンでは精製水で溶解することを推奨しています。別のメーカ(キャピリアVT)では、滅菌生理食塩水での溶解を推奨しています。(まだ、この実験はしていませんが・・)滅菌生理食塩水と精製水との違いは何なのでしょうか?ご教示お願いいたします。
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乳酸菌の菌数測定に用いる培地について質問させて頂きたく、ご連絡差し上げました。
食品中の全ての乳酸菌数(ホモ型、ヘテロ型含む)を網羅的に知る培地を探しております。適切だと考えられる培地をお教え頂ければ幸いです。
現在はBCP加プレートカウント培地を検討しておりますが、その他にお勧めの培地、もしくは複数の培地を組み合わせる方法等ございましたら、ご教授下さい。
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現在弊社では、御社の顆粒300gのマンニット食塩培地に、無菌卵黄液を入れ、調製し使用しております。
この調製に時間を要する為に、調製済みの培地への変更を検討しております。
御社のコンパクトドライを検討しておりますが、マンニット食塩培地との違い「原理、結果の相関性」等についてお聞きしたことがございます。
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以前から使用していましたが、今回購入したもののラベルを見ると、1リットルあたりの使用量が変わっていました。
ホームページの商品一覧を見ると以前のままです。ラベルの表示量通りに使用してかまわないのでしょうか。
弊社ではいろいろな培地を使用しているので、早見表を作成し、それをもとに調製していました。使用量がいつのまにか変更になっているというのは想定外で少し慌てました。変更する際にはコスモ会ニュース等で周知していただけるとありがたいのですが、検討していただけないでしょうか。
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コンパクトドライセレウス菌について、最小包装単位と開封前および開封後の保存方法、使用期限の目安について教えてください。
1)包装が40枚とありますが、40枚/袋ですか
2)開封前、室温1~30℃での保存で1年間とありますが、冷蔵庫での保存はできますか。
3)Q&Aのほうに腸炎ビブリオの開封後の培地が3ヶ月程度で変色があったようです。セレウス菌培地の開封後の保存方法、使用期限の目安を教えてください。
4)購入方法 必要日数 サニーフーズネットをよく利用しますが、こちらでの購入は可能ですか。
5)購入した際、残存使用期限はどのくらいのものが送られてきますか。
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大腸菌群の判定について、質問があります。
デソキシレート培地にて赤いコロニーが検出され、BGLB培地にてガス陽性反応があるもの関わらず、ブルーライト培地で培養しても、無色透明もしくは白濁している場合があります。なぜでしょうか?
また、この白濁したブルーライト培地を過培養(35℃2日以上)した場合、ピンク色から赤紫色になりました。大腸菌群の判定はどのようにすればよいでしょうか?
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私はソース類の食品工場の品質管理を担当している者です。
細かい質問で申し訳ありませんが、ご対応の程宜しくお願い致します。
私共は微生物検査でオスバン溶液を霧吹き容器に入れ使用しています。そこで、容器内のオスバン溶液は1日の検査終了後の対応は以下の2つのどちらの方が微生物が増殖しにくく、適切なのかを教えて頂きたいです。
1) 当日:使用した容器内のオスバン溶液を捨て、容器内を洗い、乾かす。
翌日:新しく作ったオスバン溶液で容器内を共洗いし使用する。
2) 当日:使用した容器内のオスバン溶液はそのまま翌日まで放置。
翌日:使用直前に古いオスバン溶液を捨て、新しく作ったオスバン溶液で容器内を共洗いし使用する。
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御社の質問箱の「内部精度管理」回答で「菌数をグラフ用紙にプロットして折れ線グラフを作っていきます。菌数が目標値に近く、折れ線グラフの振幅が小さければ精度は良好と判断できます。」について、伺いたい事がありメールさせて頂きました。
私は、他社が販売している「枯草菌芽胞液」を使用して内部精度管理を行っております。その場合も菌数をグラフ用紙にプロットし折れ線グラフを作成した方が、いいのですか。
また、内部精度管理の菌数グラフを作成した事がありません。グラフの作成の仕方についても教えて頂けたら幸いです。
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大腸菌群の判定について
XM-G寒天培地にて大腸菌、大腸菌群の判定を行なっています。
ピンクまたは赤色のコロニーを大腸菌以外の大腸菌群と判定しておりますが、中心部が赤色で、まわりが白色のコロニーはどのように判定したらよいでしょうか?
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標準寒天培地に黒いコロニーが出ました。
検体は、未加熱の鶏ムネ肉です。今まで何年と細菌検査をしてきましたが、初めて見る色です。。
この黒いコロニーは一体なんでしょうか?。
写真を添付致しますので、ご返答の程よろしくお願い致します。
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クロストリジウム属菌の検査で、褐色~黒いコロニーが検出された場合はその数をカウントしますが、全くコロニーが出ていない場合、「陰性」となるのでしょうか?
教えてください。
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初歩的な質問ですみません。最近リン酸バッファーを作成し使用するようになったのですが、分からない点があります。
リン酸バッファー原液(滅菌していない)の保管方法を教えて下さい。
褐色瓶に入れ冷蔵保管でよろしいのでしょうか?
(使用量が少ないため、作成量も最小限で作成しております)
この原液の日持ちは、どのくらいでしょうか?
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SPC、DESO培地の培養温度についてお問い合わせします。
培地の説明書では、培養温度35℃±1℃ですが、乳等省令では32℃~35℃になっています。この違いはどういう理由からなのでしょうか?お教えいただければ幸いです。
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コンパクトドライの使用方法について教えてください。(X-SA) (1) 培養液を1白金耳量画線する、使い方は間違いでしょうか。培地を購入して画線法を採用したいと思います。
(2) で検出された集落を直接コアグラーゼ試験にいく操作は間違いでしょうか。
(3) X-SA寒天培地の組成が第24版製品要覧と食違っているようですが。培地とプレートは違っている物ですか。
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現在、海外の工場で御社のニッスイコンパクトドライ 一般生菌用の培地を使用しているのですが、判断困る結果がありご連絡いたしました。 1.培養したプレートの培地全体がピンクがかってしまった。コロニーは赤い点になって現れているものもあるが、ピンクの部分をどう判断するかがわからない。 説明書には「菌数が多い場合は、培地全体が着色したようになる」との記載があり、こちらのケースではないかとも考えたのですが、よくわかりませんでした。 2.培地全体がピンクがかっている上に、小さい赤い点が無数に出ていた。 こちらの場合は、菌数が多すぎて赤い小さな点になったのだと考えたのですが、合っておりますでしょうか? 3.また、培地上で、赤い点になっている部分はカウントできるのですが、一部分だけに赤が広がっている状態が培地上に数個見受けられました。 こちらは、一塊りにつき菌数ひとつとしてカウントして良いのでしょうか?
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現在、私どもはフードスタンプ(黄色ブドウ球菌用・TGSE寒天)を用いて、ヒトの皮膚表面に存在する黄色ブドウ球菌を測定しております。その際に、CO2インキュベーターを用いて37℃で約3日間培養しているのですが、形成された黒色コロニーに見本ほどはっきりとした卵黄反応が認められません。これはやはり黄色ブドウ球菌ではないのでしょうか?私どもは表皮ブドウ球菌かもしれないと考えているのですが、もし違うのであれば、どうような菌が考えられるでしょうか?
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検査の精度管理に関して、質問をさせて頂きます。現在、弊社では、貴社で実施してらっしゃる「細菌検査精度管理サーベイ」のような外部精度管理の他に、内部精度管理を実施し、検査レベルの底上げを図りたいという声が上がっております。そこで質問をさせて頂きたいのですが、貴社では内部精度管理に関する製品またはキット等の取扱いはなさっておりますでしょうか?尚、弊社では主として、一般細菌及び大腸菌群を検査項目として実施しております。
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BGLBについての質問です。
弊社大腸菌群の検査で、デソキシは陰性ですが、BGLBで陽性反応がでることがよくあります。
BGLBは、感度が良すぎて(?)大腸菌群以外の細菌でも反応してしまうということなのでしょうか?
BGLBは、精度としてあまり高くないのでしょうか?
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X-MG寒天を、混釈平板培養しますが、表面がデコボコして、平らになりません。培地が混ざってないのか、シャーレに流す温度(50℃前後)が悪いのか、原因がわかりません。
ちなみに、標準寒天も同じように作業しますが、特に問題ありません。
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弊社は、調味料を製造しております。
無菌テストを実施することもあり、その滅菌希釈液は、滅菌リン酸バッファーを使っています。
一方、一般生菌数や大腸菌群では、滅菌生理食塩水を使用しています。一般生菌数や大腸菌群、黄色ブドウ球菌を検査する際は、滅菌リン酸バッファーを使用しても問題ないでしょうか?
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NGKG寒天培地の培養する温度ですが、使用していますインキュベーターが1台で35℃の設定で使用しています。35℃設定でも大丈夫でしょうか?
初歩的な質問で申し訳ありませんが、ご回答宜しお願いいたします。
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培地はポテトデキストロース寒天培地で、検体は小麦粉です。
30℃、5日間培養しました。
添付の写真の黒いコロニーをグラム染色したところ、酵母であることがわかりました。
グラム染色をする際、糸を引きましたが、特殊なものなのでしょうか?
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フードスタンプについて伺いたい事があります。
現場にてフードスタンプを使用し検体採取後、すぐにふ卵器に入れる事が出来ない時の対処方法を教えて頂きたくメールしました。現場までは、発泡スチロールと保冷剤を使用して冷蔵状態に似た状態で持って行くようにしています。
また、採取後に何時間以内にふ卵器に入れて培養するのが好ましいですか。
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お世話になります。
マンニットから、X-SAに切り替えたばかりです。
ご教授いただけましたら幸いです。
1、X-SAに陽性限界 この色まで陽性 のような、写真はございますか。
2、発色酵素基質は具体的にはどんな気質が何の酵素と反応して発色するのでしょうか? オープンになっておりますか?あるいはオープンになっておりませんか?
3、マンニット食塩寒天培地とX-SAの相関のデータはございますか
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YM寒天培地を使用した耐糖性酵母の検査を行いたいと思いますが培地の調整方法と検査方法を教えて下さい。
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現在PDAでカビの観察おこなっているのですが、より明解にアスペルギルス属とペニシリウム属の観察をしたいと考えています。ツァペック寒天培地(CZA)が推奨されていますが、ツァペックドックス培地は、組成は違う部分がありますが、同じような目的で使用できる培地と考えてよいのでしょうか? また違う培地でそのような培地があれば教えてください。
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製造現場で使用している製造用水の生菌数試験を実施するにあたり、R2A寒天培地及び標準寒天培地を使用して、製造用水の原液1mLと10倍に希釈した液1mLを各々MF法にて実施しております。
しかし、通常の考え方ですと、両方ともに同等レベルの菌数が検出されると思っておりましたが、
R2A寒天培地の場合、例えば
原液1mL:48cfu/mL・10倍希釈液1mL:440cfu/mL、
原液1mL:90cfu/mL・10倍希釈液1mL:840cfu/mL・・・・
標準寒天培地の場合、例えば
原液1mL:2cfu/mL・10倍希釈液1mL:40cfu/mL、
原液1mL:768cfu/mL・10倍希釈液1mL:140cfu/mL、
原液1mL:108cfu/mL・10倍希釈液1mL:190cfu/mL・・・・
10倍希釈液のほうが菌数のオーダーが高い場合や、原液と10倍希釈液の同等性が確認できない場合があります。
*希釈はリン酸緩衝液pH7.2を使用しております。
*リン酸緩衝液をNCとして分析しても0cfu/mLでした。
*原液と希釈液で使用する培地は同ロットのものです。
質問
(1)10倍希釈液のほうが菌数のオーダーが高いというのはどういう要因が考えられるのでしょうか?
(2)生き物なので数値としては示しにくいとは重々承知しておりますが、どのような場合同等性がないと言えるのでしょうか?
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大腸菌群と大腸菌とE.coliの違いを教えてください。
集合で表すと大腸菌群が大きな輪で中に糞便系大腸菌群(E.coli)その輪の中に大腸菌ですか。
食品衛生法での呼び方と細菌学的には違いますか。
食品で食中毒になる大腸菌O-157は、どこになりますか。
大腸菌群や大腸菌、E.coliの検査の意義は何ですか。
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室内でのコンパクトドライ使用は可能ですか。
室内とは通常の作業場の意です。
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フェイバーGについてのMSDSを拝見しました。
使用後の排水についてお伺いしたいことがあります。
フェイバーGの染色液、脱色液にはピクリン酸が使われているようですが、食品工場の検査室でグラム染色を行った場合、水質汚濁防止法等に違反するようなことはあるのでしょうか。
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「酢酸菌」について質問させて頂きます。
「酢酸菌」を培養しようと思っているのですが、何も知識が無く、情報も無く困っています。まず、培地はどれを使用したら良いでしょうか?
ネットで色々検索していたのですが、「SM培地」にエタノールを添加すると良い いう方法が載っていました。この「SM培地」は調整済みのものが販売されいていますでしょうか?最初から調整しないとダメでしょうか?
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食品の微生物検査をしています。
ラパポート培地について教えてください。
作りおきは、可能でしょうか?
可能ならば、何度で、何日程度まで大丈夫でしょうか?
以前作成後、5℃で約2週間保存したら白濁してしまいました。白濁したものでも使用できるでしょうか?
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培地は標準寒天培地で、検体はアルコール製剤に浸漬させたネギです。
30℃、48時間培養したものです。
添付の写真の赤色コロニーはなんでしょうか?
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(1)弊社で製造している食品原料について、現在NGKG寒天培地にてセレウス菌の検査を実施しています。セレウス以外で、卵黄反応陽性でありかつセレウス様の集落を形成する微生物にはどのようなものがあるのでしょうか?また、その菌は一般的に生育しているものでしょうか?一般的にどの程度の確立で混入してくるものなのでしょうか?(セレウスだと同定できるおおよその確立)
(2)セレウス菌は通常土壌などに広く生育しており、芽胞を作る食中毒菌かと思います。日本でセレウス菌の菌数規格している食品というのはあるのでしょうか?
以上よろしくお願い致します。
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標記の件で、使用方法を確認したいです。
「コンパクトドライ「ニッスイ」VP」に入った取り扱い説明書の操作法の1.に「材料に緩衝液。。。」と記載していると思いますが、その「緩衝液」は「食品衛生検査指針収載のリン酸緩衝生理食塩水」でしょうか?
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X-VP寒天培地を用いた腸炎ビブリオの判定方法について質問です。
海水をX-VP培地に塗抹して20時間培養したところ、中心が薄い緑色を呈する白色コロニーがあり判別に迷っております。後ほど写真をメールにて添付しますのでご確認お願いいたします。
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XM-G培地での分析手順
とても基本的な質問ですが、XM-G培地にて大腸菌群の分析をする場合は、混釈培養する場合、重層したほうが良いのでしょうか?
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コンパクトドライの腸炎ビブリオ用の培地についての質問です。
培地に変色していたものがありました。
6月下旬に培地を使用し、余りは袋の口を丸めセロハンテープでとめて室温で保管していました。 9月4日にその袋の培地を見ますと、黄色に変色していました。このような培地は使用できるのでしょうか。
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(1)コンパクトドライX-SA上で縁が青いコロニーの判定。
(2)コンパクトドライX-BC上で全体の面積の1/3程が青い場合の判定。
(1)、(2)について教えてください。
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デゾキシコレート培地の調製についての質問です。
培地を加温溶解して、55℃に保温して使用しているのですが、培地を分注している最中にどんどん固まってきて塊が出来てしまいます。
ちなみに加温溶解は電子レンジで加熱しています。電子レンジで溶かしているのが原因なのでしょうか?回答よろしくお願いします。
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サルモネラの判定について
TSI培地及びLIM培地での検査で陽性と思われる結果が出ました。初めての陽性反応でとまどっております。そこで確認をお願いしたいのですが。
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硫化水素生産性サルモネラと非生産性サルモネラの違いを説明して下さい。
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食塩卵寒天培地で、黄色ブドウ球菌に似たハローが出ています。
ラテックスで凝集反応は見られず、グラム陽性球菌でした。
このようなコロニーの出方で、考えられる菌種を教えていただければと思います。
わかりにくい写真ではあるかと思いますが、添付ファイルのご確認お願いいたします。
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いつも質問箱を参考にさせて頂いてます。
今回は、検査技術についての質問をさせて頂きたくメール致しました。
通常使用している「オートピペット」が、事情により一ヶ月間程使用出来なくなったのですが、その間も検査を実施したいと思っています。
しかし、代わりとなる「オートピペッター」・「駒込ピペット」や「ゴムキャップ」は、持っていません。
サルモネラ検査を行う為、口で吸うのも抵抗ありますが、その方法もやるべきか考えています。
他に、方法等がありましたらご指導宜しくお願いします。
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いつもお世話になっております。
弊社では、御社の「食塩卵寒天基礎培地」に卵黄液を添加し、黄色ブドウ球菌の検査を行っています。
この培地に時々、白いコロニー(黄色ブドウ球菌判定基準のハローはありません)が出現するのですが、この培地ではどのような菌が反応するのでしょうか?
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BCP加プレートカウントアガール培地の判定についてお教えください。
使用方法:35℃72時間培養後、菌数を算定
鑑別法:培地の深部および表面に周囲が黄変した集落を形成して発育するのでその数を計算・・・するとありますが、これは、培地の色が紫色になってしまってもそのまま数えて良いのでしょうか?それとも、紫色になってしまたら数えないのでしょうか?
また、紫色になってしまった培地に過酸化水素をかけて乳酸菌か否か判断出来るというような事をきいたことがありますが、こちらについても情報があやふやなため、正しいところをお聞きしたいと思います。
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一般的に酵母菌は、中心温度何度で何分加熱すれば死滅するのでしょうか?
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XM-G寒天培地での食品規格基準にあります、(0.01g×3中EC培地法)とありますが、XM-G寒天培地においても同基準でしょうか?
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1)E-coliについて
通常弊社では、EC培地を入れた試験管を恒温水槽にひたし、44.5℃に保っています。この試験管をインキュベーターに入れて温度を保つことでも問題ないでしょうか?
2)E-coli培養温度は44.5℃、サルモネラ培養温度は41℃です。インキュベーターを44.5℃に保ち、E-coliとサルモネラを同じインキュベーターで培養してもかまわないでしょうか? もちろん、本来の培養温度は異なりますので、よいとは言えないことは承知しています。弊社の機器都合上、可能かどうか確認をよろしくお願いいたします。
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1.一般生菌数測定用 標準寒天培地(顆粒)「ニッスイ」と、TSA培地の培養1日の結果は、同等であるのか教えてください。
2.あと1点、教えていただきたいのは、標準寒天培地(酵母エキス2.5g ペプトン5g ブドウ糖1g 寒天15g 1L中)は、35℃±1℃で48±3時間培養した場合と35℃±1℃で22~26時間培養した場合とでは、結果は異なりますか??
上水試験方法に準拠して試験をする場合は、この培地で35℃±1℃で22~26時間培養で、 大丈夫なのかなと思いまして。
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1.乳糖ブイヨン培地の判定について。
ECテスト陽性→EMB培地で赤紫のコロニーが見られたため、これを乳糖ブイヨン培地に移植しました。35℃で48時間培養後、ガスは微量ですが発生しました。培地の色は試験管の底部が黄色になっていましたが、試験管を振って混ぜると全体が緑色になりました。この場合、酸の産生はどのように判定すべきでしょうか。
2.質問の趣旨は、「試験管底部のみ黄変し、振り混ぜると全体が緑色に戻る程度の培地の黄変で、酸の産生ありと判断してもよいか」、ということでした。ご回答の内容から、酸の産生ありと判断するのだと理解しました。(違っていればご指摘下さい)
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氷雪を培養しています。標準寒天培地だと培養時間24時間なのですが、コンパクトドライでも24時間培養でいいのでしょうか?説明書に48時間培養としか記載していなかったので教えてください。
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使用スケール等についてお尋ねいたします。
私どもは、食品中E. coliの検査で、EC培地での推定試験の後にブルーライト培地に接種します。
この際のブルーライト培地のスケール(中試験管で10ml程度、小試験管で3ml程度、など)と、EC培地からの接種量(EC培地がfinal 10倍希釈程度なるように、1白金耳程度、など)について御社でお持ちのデータよりご教示いただけると幸いです。
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いつもお世話になっております。さて、今回はデソキシコレート培地につきましてご質問させて頂きます。
先々月、外部精度管理検査を実施した結果、大腸菌群数が基準値と差異があり、不合格となってしまいました。
基準値よりも実測数が『やや高め(菌数過多)』に検出されたようです。
検査に使用したデソキコーレイト培地は当日調整し、55℃で保温していました。培養時間も24時間実施し、計測を行いました。
大腸菌群の判定基準は赤色を示したコロニー(好気性、嫌気性含む)のみであり、白色を示すコロニーは除外するという認識ですが、コロニーが多く検出されたり、低く検出される原因は何かあるのでしょうか?
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Q&Aの冷凍ピザの生菌数の件で教えていただきたい事があります。
ナチュラルチーズを使用した冷凍ピザにおいて、加熱後摂取冷凍食品で生菌数は10万個/g以下の規定が適用されますというご回答がありましたが、食品衛生法施行規則及び食品、添加物等の規格基準の一部改正について(施行通達)(昭和48年5月24日環食第110号)の第二、運用上の注意3の部分で、「微生物の働きを利用して製造された食品(例えば、生地パン、納豆、ナチュラルチーズ入りパイ等)を凍結させたものであって容器包装に入れられたものについては、冷凍食品の成分規格のうちの汚染の指標としての細菌数(生菌数)に係わる部分は、適用しないものであること」
という記載があります。
ナチュラルチーズを使用した冷凍ピザの場合、この部分が該当することにはならないのでしょうか。
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ご返信ありがとうございました。では画像を添付致しますので、ご確認のほどよろしくお願い致します。
35℃24h後の画像では、濃度が濃い箇所の一部で青く反応しています。
また常温で一晩放置したものでも同様に濃度が濃い箇所が青く、またそれ以外のところもやや薄いですが、青くなっています。
なお、どちらも同一プレートで、単離した菌株を画線したものです。
この菌株はCCペトリフィルム(3M社製)でガスを発生した株で、また弊社が使用しているクオリコン社のリボプリンタシステムではSerratia属と同定されています。
その他の情報としては、メルク社のクロモカルト培地でも試験してみましたが、24h後は全く反応なし、同じく常温で一晩放置した後は赤色(紫色)に反応が見られました。 (酵素による反応で色が変化したのか、それとも菌自身が出す色素により色が出たのかわからなかったため、青色で確認できる御社の製品を試してみました。)
以上、よろしくお願い致します。
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いつもお世話になっております。
御社のX-GAL寒天培地を使用しているのですが、今回判定に迷うコロニーがありました。 具体的には、菌の濃度が濃い部分では一部青色に呈しましたが、それ以外の部分では反応が見られませんでした。
またその培地を常温で一晩放置していたところ、ほぼ全てのコロニーが青色を呈しました。
この場合、ガラクトシダーゼ陽性と判定すればよいのか、それとも陰性と判定すべきなのか、わかりません。
またどうしてこのような現象が発生するのかについても気になります。
できれば画像上で判断頂き、ご教授頂きたいのですが、本メールには写真が添付できませんので、何らかの方法で写真を送付させて頂けないでしょうか?
また御社の「食品微生物検査 培地マニュアル 新版」についてですが、X-GAL寒天培地の判定の原理の項を確認すると、「乳糖の分解産物の1つであるガラクトースはβ-ガラクトシダーゼにより分解される」と記載があります。
ここで質問なのですが、乳糖のガラクトースへの分解にはβ-ガラクトシダーゼは機能していないのでしょうか?
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いつも、コスモ会メールをお送りいただき、ありがとうございます。
ショウガの抽出エキスパウダーの微生物検査に、コンパクトドライのTC,CF,YMを使用しました。
通常弊社で使用している貴社の生培地、トリプトソーヤ、X-GAL、サブローでも同じものを試験したところ、一般生菌数で異なる結果が出ました。
10倍希釈の検液を0.1mlトリプトソーヤ生培地に表面塗抹したところ、3~5個のコロニーが検出されました。
しかし、コンパクトドライのTCでは10倍、100倍希釈共に、コロニーは検出されませんでした。
ちなみに、他社の乾燥培地でも、一般生菌数は同じレベル検出されました。
なにが、違う原因なのか、教えていただきたいと存じます。よろしくお願いいたします。
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コンパクトドライX-SAについて質問です。コンパクトドライX-SA上に発育する黄色ブドウ球菌以外の菌はどんなものがありますか? また、特にBacillus属については、取扱説明書に、「一部のBacillus属菌で水色~青色の発色が認められることがありますが,本培地上ではその発色は弱く,摺りガラス状の比較的大きく扁平なコロニーを形成するため鑑別は容易です。」とありますが、発育した写真はありますか?
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自主検査で嫌気性菌の検査としてクロストリジア測定用培地を用いたパウチ法を採用しております。培地容器の側面に、「品質の点でC.bifermentans,C.sporogenes,C.butyricumなどが重要」との記載がございますが、当方にクロストリジウム属に関する資料が乏しく、ウェルシュ、ボツリヌスのほかに品質に関する資料などございましたら、ご紹介いただけますと幸いです。また、同様に魚類に関する嫌気性菌の食中毒および品質事故などございましたら、ご教示いただきたくお願い申し上げます。
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弊社では現在、コンパクトドライYMを使って酵母・真菌数を測定しています。
ある検体を加熱せずコンパクトドライYMに接種すると、大きい青いコロニーが発育し、その数は数百万cfu/gでした。
この検体を80℃、30分加熱した後に測定すると、大きい青いコロニーは現れず、非常に小さい青いコロニー(0.1mmぐらいの大きさ)が現れ、その数は数十cfu/gでした。(ルーペを使ってコロニーを見つけています。)
上記のような非常に小さいコロニーも生菌数としてカウントしていますが、問題ないでしょうか。
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はじめまして。私は食品工場で衛生検査をしています。 br> 今回、冷凍ピザの検査についてお教えください。 br> 品名 冷凍米粉入りピッツァ br> ウインナー、ナチュラルチーズ、ピザソース、ピーマンがピザ台に上にあります。 br> この商品の大腸菌群、黄色ブドウ球菌、サルモネラ、真菌の検査を依頼されました。 br> br> (1)ナチュラルチーズがトッピングされていると生菌数は多くなると思いますが、検査は必要ないのでしょうか?成分規格の加熱後摂取冷凍食品(凍結前加熱以外) の分類に入るのでしょうか? br> (2)E.coliの検査は必要でしょうか? br> (3)大腸菌群の検査は、Deso培地を使って行いました。 br> Deso培地上に定型的色ではないけれども赤色の大きなコロニーが出現し、EMB培地に画線したところ菌の多い所では濃い紫色、独立コロニーは小さく、EMB培地の色が反映されているような透明感のある紫色でした。 br> EMB培地でも定型的とは思えませんでしたが、LB培地へ植え継ぎました。48時間後培地は黄変しましたが、ガスは、ダーラム管の1/10ほど、試験管を振っても細かい泡の発生は見られませんでした。 br> 同一の菌をXM-30(エルメックス)に植えたら、反応は(+)、蛍光は(-)、インドール(-)でした。 br> グラム染色は、グラム陰性短桿菌でした。 br> この場合、乳糖を分解して酸とガスを発生するという大腸菌群の定義のガス発生がみられないと判断してよろしいでしょうか? br> 以前、別の商品ですが、1996年の食品衛生検査指針「追補Ⅱ」に収載された「トリコロール」(エルメックス)をDesoを併用して検査したところ、トリコロール培地ではコロニーが見られ、Deso培地では検出されなかった事がありました。 br> 酵素基質法による判定の差をどう判断したらよろしいでしょうか? br> (4)サルモネラの前培養の培地について br> EEMブイヨン培地と緩衝ペプトン培地では差があるでしょうか? br> 以上宜しくお願いいたします。
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サルモネラの選択増菌培地としてラパポート・バシリアディス培地を使用しています。 緩衝ペプトン水での前増菌培養液を1ml接種した後18時間培養すると何らかの細菌が増殖して?濃緑青色が白く変色する場合があります。どのような機構で白く変色するのでしょうか教えてください。マラカイトグリーンはpHの変化で白変色する色素なのでしょうか?
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さて、今回ご相談させて頂きたい件が御座いまして、ご連絡させて頂きました。 br> 先週末から、XーSA寒天培地の使用を本格的に実施しておりますが、扱い慣れていない酵素基質培地の特性や、判定基準について戸惑いを感じております。是非、判定方法について助言を頂きたいと思いまして、ご連絡致しました。 br> 添付した写真は、27日に製品検査を実施し、正午頃(12時)から、孵卵器内にて24時間培養を行い、28日の正午頃(12時)に確認した、3検体分・3種類のシャーレ画像です。 br> XーSAの作製手順に従い、実施を行った結果、青色のコロニーが確認されたシャーレが確認されたため、上から1枚目と2枚目の画像を黄色ブドウ球菌「陽性」と判断致しました。そのすぐ後に、栄研化学株式会社で販売している黄色ブドウ球菌鑑別用「PSラテックス」を実施し、陽性反応が示されるか確かめようとしましたが、「陰性」反応を示しました。 br> 画像3枚目は青色発色が弱く、表皮ブドウ球菌だと確信し「陰性」と判断致しましたが、画像1枚目と2枚目の青く反応したシャーレについては「陽性」と判断しても良いのでしょうか?ご回答、宜しくお願い申し上げます。
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Afipia broomeae 及びBradyrhizobium spの分離用培地と培養方法を教えて下さい。 また、これらの菌は一般的にどんな処に存在するのでしょうか。 お忙しい処申し訳ありませんが、宜しくお願い致します。
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TGSE寒天の判定 br> 黒色でコロニー周辺が白濁するとありますが、どの程度のものを黄色ブドウ球菌と判断するのでしょうか?黒色のコロニーは多数発生するのですが判断が出来ませんので詳しくお教えください。写真をいくつか添付いたしますのでよろしくお願いいたします。
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浅漬メーカー品質管理担当の者です。浅漬の漬液を生理食塩水で10倍希釈した検体を、XM-G寒天培地で混釈法にて検査したところ、10,000個/g程度の青いコロニーが認められたため、青いコロニーが出た培地を外部検査機関に検査依頼したところ「大腸菌陰性」の結果でした。この場合青いコロニーは大腸菌ではなかったということなのでしょうか?大腸菌以外の菌が青色を示す場合は多いのでしょうか?
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XM-G培地を使い、培養したところ24時間では白いコロニーが検出されてはいましたが、大腸菌群は陰性と判断しました。しかし、さらに24時間培養したところ(合計48時間)そのコロニーが赤く変化しており陽性になっていました。
こんなことはあるのでしょうか?これは大腸菌群なんでしょうか?
乳酸菌の培地で検査をしたところ24時間後にはコロニーの周りも黄色く変化し乳酸菌の検出だと判定いたしました。しかし、48時間後には黄色の培地がものと紫色の培地に戻っていました。
これはどういうことでしょうか?
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サルモネラ検査においてX-SAL寒天培地に画線する際に検査担当者は白衣を着用するようにしたのですが、その白衣を不織布で出来た使い捨て式のものにしても大丈夫でしょうか?
もし使い捨て式のものでも良い場合、連続して(2週間くらいとか)使用することは可能でしょうか?
やはり毎日滅菌・廃棄という形をとった方が良いのでしょうか。
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大腸菌群試験用培地、BGLB培地と乳糖ブイヨン(LB)培地について教えてください。
これまで、LB培地は培地自体に栄養素が豊富なので、検体自体が栄養素を持っていないものの試験に使用する、という認識をしていました。
栄養素がないからこそ、「余分に」栄養を与えてやって、より良い条件で大腸菌群の有無を確認する、そのためにLB培地を使用する、と思っていたのです。
ところが、いろいろインターネットで調べていると
・LB培地は非選択培地 (微生物を抑制する物質が入っていない)、BGLB培地は選択培地(グラム陽性菌を抑制するために胆汁酸とブリリアントグリ_ンが入っている) です。一般的に細菌に対する栄養素が含まれる検体にはBGLB培地を使用し, 栄養素を含まない検体にはLB培地を使用します。
・LB培地は選択性がなく、BGLB培地で生育できない大腸菌群も生育できるが、大腸菌群以外の最近も増殖する、とのことです。
組成を調べてみると、LB培地には栄養源とみられる肉エキス、BGLB培地には抑制剤として乾燥牛胆汁が入っています。
LB培地は栄養が豊富なので、大腸菌以外の菌も発育させることができ、BGLBで選別する(色素のブリリアントグリーンと胆汁はグラム陽性菌の発育を阻害するそうです)という流れのように感じます。
などとありました。
ということは、
BGLB培地
・食品等にはもともと微生物が多種多数存在すると考えられるので、グラム陽性菌の発育を抑制させる必要がある
・牛胆汁末は栄養素ではなく、グラム陽性菌抑制剤である
LB培地
・元々微生物自体が存在しないかもしれないから、グラム陽性菌の抑制をしなくても良い
・やはり、BGLB培地より栄養が豊富である
ということでしょうか?
食品衛生検査指針には
原則として、BGLB培地は細菌にとって栄養素の豊富な食品全般に適用され、乳糖ブイヨンは栄養素の少ない清涼飲料(水)、ミネラルウォーター、氷雪、食品取扱い器材などのふき取り材料に適用される
としかなく、培地の選択性の有無には触れられていません。
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弊社の一部の製品で「セレウス菌」の検査を実施しようと考えています。
定性法で検査を実施しようという方向で動いています。
定性法でも「直接法」と「増菌法」の2種類あるみたいですが、どちらの検査方法で実施すればよいのか迷っています。
「直接法」の方が判定までにかかる時間が短く、簡単なのですがサルモネラ検査のように増菌して塗抹したほうが確実な結果がでるというようなことはあるのでしょうか。
検体によって直接法と増菌法を使い分ける必要はありますか。
また、御社にセレウス菌検査に必要なNGKG寒天培地かMYP寒天培地の生培地はありますでしょうか。
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教えて頂きたいのですが、マヨネーズ等で標準寒天培地では菌の発育が認められず、BCP加プレートカウントアガールでは乳酸菌の発育が見られる事があるのですが、標準寒天培地では乳酸菌は発育しないのですか?
SPC:0に対し BCP:4000個
SPC:0に対し BCP:550個などです。
基本的なことで恐縮ですがよろしくお願いします。
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ちょっと質問なのですが、食品の微生物検査に関する資格試験など、なにかご存じないでしょうか? 社内で数人、そのような試験を受けようと動いているのですが、あまり見つからないので、なにかご存知でしたら、教えていただけますでしょうか?
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弊社サンドイッチ工場においてフライヤーでエビカツを揚げる製品がありますがフライオイル中にアレルゲンが残存するものでしょうか?
また、小さいエビの混入による海苔の扱い等はどうするのでしょうか?
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粉末顆粒培地が入っているボトルを廃棄しようと思いますので、材質を教えてください。
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早速ですが、デソ培地の判定についてお聞きしたいのですが、今回の講習を受けた後から重層せずに1層のみで検査を行なっています。 すると培地の表面に色がピンクのコロニーがでることがあります。(添付書類をご確認ください。) 色のことなので「ここまで」と明確にするのは無理なのかも知れませんが、何か判別方法があれば教えてください。 よろしくおねがい致します。
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「食品微生物検査 培地マニュアル」はどこで買えますか?
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食品検査の技法を理解するための参考書を探しております。お勧めの書籍がありましたらご紹介してください。
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XM-G寒天培地で大腸菌群および大腸菌の定量を考えています。大腸菌とは別に大腸菌群全体をカウントする場合には赤色コロニーと青色コロニーの合計を出すのでしょうか?大腸菌にもβ-ガラクトシダーゼ活性があるはずですので、この場合どうしたら良いのかご教示ください。
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乾海苔に存在している細菌を調べたところPseudomonas属が多いことがわかりました。そこで、Pseudomonas属について性質を調べたところ、疑問がわいて参りました。乾海苔(焼成前の板海苔)中に存在するPseudomonas 属細菌について、
(1)55℃雰囲気中に1時間程度置いたら減少するのか?(熱に弱い)
(2)乾海苔(水分10%程度)中で減少するのか?(乾燥に弱い)
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ECブルーMPNプレートは、平成19年に厚労省の通知によるクリプトスポリジウム等指標菌検査の大腸菌定量検査における「簡易方法」でしかないのでしょうか?
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名称が一般生菌数測定用となっておりますが、これを用いて細菌+真菌数を測定することも可能でしょうか?使用温度が35度となっているので、細菌数の測定が主であるとは思いますが、温度条件を変更することにより、真菌数も測定できないかと思い問い合わせしました。
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みそ製品中の酵母の測定方法を教えてください。80℃、4分間の殺菌をしております。殺菌の効果確認(膨張しないこと)のためです。
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SCDより栄養分に富むとされる培地をご紹介ください。LB培地、ハートインフュージョン培地などでしょうか?環境検査でSCDと併せて曝露させSCDで検出されない菌を検出したいとの要求があり苦慮しているところです。
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黄色ブドウ球菌用フードスタンプTGSE寒天とX-SA寒天は具体的にどのような違いがあるのでしょうか?
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現在BGLB培地を使わせて頂いているのですが、試験管に分注しオートクレーブにかけた時に突沸するようで、アルミキャップに培地が付着し、使用時に固まってアルミキャップが開きにくくなってしまいます。何か突沸を防ぐ方法はあるのでしょうか。ありましたら、教えていただきたいです。
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販売されているTGC培地とチオグリコール酸培地Ⅱの相違点を知りたいのですが、よろしくお願いします。
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培地の加温溶解について
BCP加プレートカウントアガールによる乳酸菌の判定
醗酵と腐敗
食品のカビに関する規制
低温細菌の定義と検査
BCP加プレートカウントアガールによる乳酸菌の判定
コンラージ棒の再使用について
自主衛生管理を支援する宅配検査システム。
宅配検査システム詳細